CAS 编号： N/A
别名： FARD
FITC-Antonia Red-葡聚糖 (FARD) 是一种葡聚糖衍生物，标记有两个荧光团 FITC 和 Antonia Red（见图 1），目前生产的分子量为 20 kDa。

结构和物理特性
从结构上看，每个荧光团（FITC 和 Antonia Red）都通过硫代氨基甲酸酯键与葡聚糖结合（图 1）。每个荧光团的取代度 (DS) 范围为每摩尔葡萄糖单元 0.001 至 0.020 摩尔染料。与葡聚糖结合的 FITC/AR 摩尔比可在 1:1 和 1:3 之间变化，并在中性 pH 下通过分光光度法进行评估。

由于葡聚糖的双重荧光标记，FITC-Antonia Red-dextran在 λ ex =493 nm光激发下（由于 FITC）在 λ fl =517±5nm 处显示荧光发射，而在 λ ex =585±5nm nm 光激发下（由于 AR）在 λ fl =600±5nm 处显示荧光发射。

TdB Labs 产品的特别之处在于，其中一个荧光团 (FITC) 的荧光（以及吸光度）高度依赖于 pH 值，而另一个荧光团 (AR) 的相应荧光在 pH 值 2 至 10 之间几乎保持不变（见图 2）。这可以准确测定活细胞或组织中的 pH 值，从而使该产品成为活体显微镜的宝贵工具。

在一系列涉及 FARD20（pH 探针）在水溶液中的实验中，同时记录了两种荧光团的荧光光谱（FITC：中心波长为 520 nm 的绿色荧光和 Antonia Red TM：中心波长为 600 nm 的红色荧光），同时 pH 值在 3.0 和 8.0 之间变化（图 3）。Labbot帮助我们可视化了FITC（“工作荧光团”）的 pH 依赖性以及 Antonia Red TM的 pH 非依赖性。

绘制 FITC 与 Antonia Red TM的荧光强度与 pH 之比，可得到一条特征性 S 形曲线（图 4），该曲线描述了 FARD20 pH 探针的性能和 pH 响应性。确定的 pKa 值为 5.91，与 FITC（工作荧光团）的标准行为相对应。记录数据与 Henderson-Hasselbalch 方程的拟合度很好，表明当酸和其共轭碱 FITC 形式的浓度相等时，FARD20 溶液的 pH 等于 pKa=5.91（见图 5）。值得注意的是，与“游离”荧光素（pKa=6.5）相比，FARD20 上结合的酸性和碱性荧光素（分别为单阴离子和双阴离子）的 pKa 略低，这表明 S 形曲线向较低 pH 值移动，从而使 FARD20 的比率活性跨度增加约。 0.6 pH 单位。

储存和稳定性
FARD20 应在室温下密封在黑暗处储存。

溶解性
FARD20 呈浅棕色至深紫色粉末或晶体，易溶于水和 DMSO。但是，它与强氧化剂不相容。

应用
FARD20 适用于需要精确检测和监测活细胞或组织中 pH 值的应用，它可以在 3.5 至 8.0 的广泛 pH 范围内运行。

https://tdblabs.se/wp-content/uploads/2023/03/fard.pdf