本ELISA免疫测定法利用竞争性抑制原理定量测定植物组织中内源性1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶 (RuBisCO)。
将Rubisco抗原预包被于微量滴定板表面。将含有Rubisco特异性抗体的标准品或样品加入到孔板中。预包被的Rubisco与样品中的Rubisco与抗体发生竞争性抑制反应。加入辣根过氧化物酶(HRP)偶联的山羊抗兔IgG抗体,然后加入底物溶液,显色程度与样品中Rubisco的含量成反比。反应停止后测量显色强度。
该 Rubisco ELISA 试剂盒含有以下试剂:
检测板:1x(96 孔板)
标准:2 x 500 µl
抗体:1 x 60 µl(100 x 浓缩液)
HRP 结合物:1 x 120 µl(100 x 浓缩液)
抗体稀释剂:1 x 10 ml
HRP 结合物稀释剂:1 x 20 ml
样品稀释剂:2 x 20 ml
样品提取缓冲液:1 x 20 ml(25 x 浓缩液)
洗涤缓冲液:1 x 20 ml(25 x 浓缩液)
TMB 底物:1 x 10 ml(避光保存)
终止液:1 x 10 ml(含酸,佩戴眼部、手部、面部和衣物保护装置)
粘合条:4x(适用于 96 孔板)
本试剂盒仅供研究使用。使用Proclin 300作为防腐剂,浓度<1%。
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储存: 2-8°C 保存。开封后的试剂盒可在 2-8°C 下保存,最长保存时间为 1 个月。
有效期:试剂盒请勿超过有效期使用。
检测范围: 3.12-800 µg/ml
特异性/灵敏度:对植物 Rubisco 酶具有高特异性和灵敏度。未观察到明显的交叉反应。