Rainbow Calibration Particles (RCP) 流式校准微球
1. 产品核心定位
Rainbow Calibration Particles (RCP) 是Spherotech公司开发的多峰流式校准微球,专为流式细胞仪的全面性能验证设计,核心功能包括:
多通道线性校准:通过多峰设计验证PMT检测器的线性动态范围。
长期性能追踪:稳定的荧光特性支持数月甚至数年的仪器稳定性监控。
灵敏度测试:额外低强度峰(如RCP-30-5A)可评估仪器检测下限。
2. 产品技术特性
特性说明
多峰设计 单一样本含4-8个荧光强度峰(如RCP-30-5为6峰,RCP-30-5A为8峰)
宽光谱覆盖 激发波长365-650 nm,覆盖FITC、PE、PE-Cy5、APC等主流通道
卓越稳定性 荧光染料包埋于微球内部,耐受冻融循环,70%乙醇处理不影响性能
定量校准 每个峰对应特定MEF值(如MEFL、MEPE),可绘制校准曲线计算线性度(R²≥0.999)
3. 核心应用场景
PMT线性度验证
通过校准曲线(Relative Channel Number vs. MEF)计算斜率、截距和R²值,确保PMT在宽动态范围内保持线性响应(文献中R²普遍>0.999)。
示例:RCP-30-5A在BD Fortessa™ X-20上的APC通道线性度R²=0.9995(见Page 10数据)。
仪器灵敏度评估
RCP-30-5A的额外低强度峰(Peak 1-2)可检测仪器对弱信号的捕获能力,适用于低表达靶标研究。
多激光系统校准
兼容BD、Beckman Coulter、CytoFLEX等多平台(文献验证机型包括LSRFortessa™、FACSymphony™、Guava easyCyte等)。
标准化实验流程
通过预设目标通道数(Target Channel)实现跨实验室数据可比性。
4. 技术优势与创新点
非光谱匹配设计:荧光染料不与常用抗体染料(如FITC、PE)重叠,避免交叉干扰,提升校准特异性。
冻存稳定性:稀释后微球可冷冻保存重复使用,降低成本(Page 1明确提及)。
自动化支持:提供免费Excel模板自动生成校准报告,简化QC流程。
5. 使用建议
校准流程
步骤1:取3-5滴RCP原液用鞘液稀释至1 mL,涡旋混匀。
步骤2:上机采集数据,设门排除聚集体(FSC vs SSC)。
步骤3:记录各峰通道数,比对MEF值生成校准曲线。
质控频率
日常QC:每周运行RCP-30-5验证线性度。
灵敏度测试:每月使用RCP-30-5A评估弱信号检测能力。
数据解读
警戒值:若R²<0.995或CV>10%,需检查光学系统或PMT状态。
总之
Rainbow Calibration Particles (RCP) 是流式细胞仪性能验证的“黄金标准”工具,其价值体现在:
多峰梯度设计:一站式解决线性度、灵敏度、动态范围验证需求。
跨平台兼容性:覆盖主流机型,支持长期追踪。
标准化输出:通过MEF值和校准曲线实现跨实验室数据对标。
特别推荐RCP-30-5A作为高端流式细胞仪(如BD FACSymphony™)的核心质控微球,其8峰设计可全面评估仪器性能极限。
关键产品型号对比 |
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货号 |
粒径(µm) |
峰数 |
特殊功能 |
适用场景 |
RCP-30-5 |
3.0-3.4 |
6峰 |
标准6峰,覆盖常规荧光通道 |
日常线性校准、动态范围验证 |
RCP-30-5A |
3.0-3.4 |
8峰 |
增加2个低强度峰,提升灵敏度检测能力 |
高灵敏度仪器验证(如BD FACSymphony™) |
RCP-60-5 |
6.0-6.4 |
6峰 |
大粒径设计,适合特殊流体系统 |
微流控或大孔径仪器校准 |
RCP-05-5 |
0.4-0.6 |
4峰 |
小粒径,模拟外泌体或微小颗粒 |
纳米流式或高分辨率检测 |
与同类产品差异化 |
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对比维度
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Rainbow Calibration (RCP) |
Rainbow Fluorescent (RFP) |
Ultra Rainbow (URCP) |
峰数 |
多峰(4-8峰) |
单峰 |
多峰(6峰) |
核心用途 |
线性度/灵敏度验证 |
光学校准 |
UV-远红全光谱校准 |
荧光强度 |
梯度分布(含低强度峰) |
单一高/中强度 |
高强度+增强UV/远红信号 |
典型CV值 |
各峰CV≤7%(文献数据) |
≤3%(单峰) |
≤5% |
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