在用QSC kit时,抗体滴度确认达不到饱合
这一般是抗体非特异性的结合引起的。常见的就是曲线持续上升而不趋于平缓。球体本身是聚苯乙烯,上面有苯环,对疏水的蛋白有吸附作用。当然最快的结合肯定是二抗与一抗之间结合,但如果您的孵育时间过长,就会让一抗与二抗结合的同时,也会与球体结合。特别是一些蛋白荧光(如PE其分子量较大240kd,更容易与球体直接吸附)。解决的办法就是减少孵育的时间,孵育后多洗几次,或是换抗体和加点表活。
RiboLace seq 起始样品细胞数量最低是多少?
细胞的翻译水平不同,很难有一个准确的判断。一般认为最低所需要细胞量为300,000个。某些细胞,如卵细胞,所需要的会更少一些。拿不准的客户,可以咨询我们,事实上我们也有针对数量较少细胞的操作方案。
BioMag® BioMag Dextran-coated Charcoal 可以用来替代sigma的C6241吗?
sigma的C6241是Charcoal, dextran coated, 是不带磁性的,就是在木碳的外面包了葡聚糖。用于吸附小分子,小分可以通过葡聚糖dextran进入木炭内,而大分子不能。Bangslabs是在磁珠外面修饰了木炭,外面再加一层葡聚糖,这样的好处是吸附完后,可以通过磁场将磁珠吸附下来,除理起来更方便,而sigma 的可能需要过滤或是离心,不能自动化。
这让我想到大家都在找纯化质谱前处理磁珠,如果感兴趣,就来找我吧!
Spherotech的质控球UFRP-30-2可以保存多久?
厂家标示的是开瓶后1年,实际上用3年也是很正常的。每隔一年,厂家都会对库存的单峰球进行质控,从他们的经验来看3-5年是没有问题的。
对于长期追踪,我们应该选择 FeREX 还是 Molday ION?
如果您正在寻找血管造影剂,我们推荐 Molday ION(CL-30Q02-2 或 CL-30Q02-2B)。
FeREX可以直接注射实验动物如大鼠吗?
是的,FeREX 可以在大鼠体内使用。Molday ION 也是一种体内 MRI 造影剂,可以用于大鼠。
FeREX 和 Resovist 一样有效吗?
不是,FeREX 与 Feridex IV 相当。如果您的客户需要与 Resovist 相当的产品,BioPAL 建议使用 Molday ION (CL-30Q02-2 或 CL-30Q02-2B)。链接如下 (www.biopal.com/vascular-mri.htm)。
Ribolace实验时,提纯物的跑胶质控是不是可以忽略?是不是可以用Total RNA library preparation kit直接建库?
最好是进行凝胶电泳验证,其他质量控制方法都不是太令人满意。
此外,由于核糖体保护片段 (RPF) 太短,总 RNA-Seq 文库制备试剂盒不适用。对于文库构建,客户应使用Immagina公司的 LACEseq 文库制备试剂盒或其他专为核糖体分析设计的试剂盒(适合于短片断建库)。