有客户问：在文献上看到“Krytox-PEG-Krytox (KPK) surfactant was purchased from Ran Biotechnology (Beverly, MA)”，请问这是什么化合物？ RAN Biotech的创始人Dr.Roger 与我们确认：就是008-FluoroSurfactant。

NIST标准粒子是检测过程严格遵循美国国家标准局（NIST）提供的流程，可溯源至NIST标准尺和标准微球，常用在尺度仪器的精密校准上。汉诺可提供纳米至微米级的全系列产品。 有客户问，在用去离子水稀释NIST微球时，通常必须使用表面活性剂来减少微球之间的疏水相互作用， 常见的是添加SDS或聚山梨酯20（Tween-20）。 浓度范围0.01-0.1％，常见浓度为0.05％。SDS是阴离子的，而Tween-20是非离子的，相同浓度下更有效有聚沉，大直径微球尤其明显。

磁珠的密度比较大，或是因为保存不当，容易聚沉。在分散时，有客户问，是不是可以像聚苯乙烯微球一样超声？ 答案是，我们建议不要超声。磁珠的四氧化三铁晶体（或是Gamma型三氧化二铁）是杂在基质或是为核包裹在微球内部，超声时，如果功率过大，会导致磁珠破裂，氧化铁泄漏。

有客户问： 我输入数值得出的这个数字就是一个细胞表面的分子数量吗？还是需要其他处理？不一样的细胞数染色得出的荧光肯定是不同的，所以想不明白怎么回事。 Quantum™ Simply Cellular® (QSC)是通过检测抗体结合能力（ABC）来间接反眏细胞抗原表达水平。先来说说其工作原理： 每个QSC试剂盒含有5种相同直径的微球：1组空白球，4组连接有不同量的FC片断捕获抗体（anti-FC fragment)。实际使用过程中，用过量的荧光标记单克隆抗体与微球孵育，根据QSC软件建立标准曲线（channel Vs ABC)。在同种条件下，用相同的抗体与细胞孵育，在相同条件下（同种FCM条件）上机检测Channel值，结果输入标准曲线，计算细胞的ABC值。ABC值就反应了抗原的表达（水平）量，ABC值高，抗原的表达量就高。 回到上面的客户问题来，如果研究人员知道抗原与抗体之间的结合比例，例如是1：1关系，那么就可以说ABC值就是抗原的表达量。但现实中，是很难知道的。ABC值的意义在于，研究人员可以对源自不同实验室或不同实验检测时间的结果进行比较分析（当然前提是实验条件完全一致）。 摘抄一段： Values obtained from our Quantum Simply Cellular kits, listed in ABC (antibody binding capacity), are intended to be directly quantitative for the number of antibodies attached to the cell. This does assume however that the user is labeling the cells/beads in a direct fashion, and not using a secondary antibody label. If using a secondary antibody label, there’s a possibility of multivalent binding between the primary and secondary, which is not necessarily equal between the beads and cells (as the primary antibody will be orientated in a different fashion between the two). For comparisons between labs, the antibody used is of importance. While multiple antibody options may exist that recognize the target of interest (e.g. CD4), if the antibodies are not identical, then possibilities of different levels of binding do exist based on varying levels of antibody affinity towards it’s epitope of interest. Even if the antibody is of the same clone, lab to lab comparisons introduce additional variation in technician staining/handling techniques for the cells/beads, and different instruments being used to analyze the stained samples as well. QSC kits can help standardize results to a degree, but these sources of variation will still exist and potentially contribute to differences in measured ABC values using the kits. These are not necessarily problems in themselves, but the user should be aware of it.

Bangslabs的流式定量试剂盒815（Quantum™ Simply Cellular® anti-Mouse IgG),有没有可以替代的产品？ 答案是有。 其实客户可以选#555 （Quantum™ FITC-5 MESF）或# 488（Quantum™ Alexa Fluor® 488 MESF），815是用二抗来模拟抗原，更接近实际环境，#555和488是直接用荧光的强弱来表示表达量，操作更简单，也证明可用，为广大科研工作者受采纳。 有的客户会问，为什么不推荐# 827 Quantum™ R-PE MESF，#647 Quantum™ Alexa Fluor® 647 MESF或#823 Quantum™ APC MESF，原因很简单，1）一般抗体是FITC标记的，更容易获得荧光一抗2）蛋白荧光很敏感，保质期较短一些。

异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长为525～530nm，是最常见的荧光化合物，信号足够强，使用也最为普遍，但为什么FITC荧光球就不能用于免疫层析卡呢？ 首先，FITC荧光容易漂白/淬灭，寿命短，限制了产品的稳定性及保质期。 其次，FITC是一种外标荧光染料，只能涂在微球表面。外标会影响微球表面的功能基团，从而影响后面微球与抗体/蛋白的偶联。 最后，研制荧光免疫层析卡的目的之一是希望能提供定量或半定量检测结果。FITC作为一种pH敏感的荧光物质，即其发光效率受环境pH的影响比较大。因此检测标本、或缓冲条件有变化，就会影响读数结果，达不到定量要求。类似的还有Alexa Fluor 647等外标荧光染料。 正是因为FITC的以上特点，不少厂家都推出了FITC的替代产品，如Polysciences的YG荧光，Bangslabs的Dragon Green。当然自从铕荧光球出现后，就很少有厂家再尝试用其它荧光微球做层析卡了。