DSS40 ,硫酸葡聚糖钠盐--结肠炎造模的经典试剂
2025-06-20
2025-06-20
人类胃肠道(GI)长期接触来自食物和环境中的多种细菌及毒素,因此极易患上多种疾病。其中,炎症性肠病(IBD)的发病率逐年上升,这包括溃疡性结肠炎(UC )和克罗恩病等慢性炎症。这些疾病由不受控的免疫反应引起,即肠道微生物群与免疫细胞的相互作用是。
通常局限于结肠的黏膜和黏膜下层,通常从直肠开始并向结肠上方延伸。主要症状包括腹泻、直肠出血、腹痛、疲劳和体重减轻。其发病机制通常始于不受控的T细胞反应,靶向特定的肠道共生细菌。它的发作或复发通常与环境因素破坏黏膜屏障有关,屏障受损引发免疫反应,包括免疫细胞浸润和促炎细胞因子的释放。
目前,炎病性肠病尚无法根治,治疗目的仍局限于症状的缓解和控制。因此,为了
三硝基苯磺酸(TNBS):通过引发迟发型超敏反应(Th1反应)诱导结肠炎。
乙酸:直接损伤结肠黏膜。
2. 细菌诱导:
这些细菌可定植于肠道并引发炎症反应,导致结肠炎发展,例如:
在此,我们主要介绍硫酸葡聚糖钠盐(DSS),因为它有许多优势。DSS是一种带负电荷的硫酸化多糖,分子量为5至2000 kDa。其诱导结肠炎的效果取决于分子量和硫酸化程度。另外,DSS的致病性还受剂量、暴露时间(急性或慢性)、动物品系、性别(如雄性小鼠更易感)和微生物环境等因素影响。
DSS通过破坏上皮屏障、增加通透性,促使促炎内容物(肠道菌)渗透至下层组织,引发免疫细胞浸润和细胞因子释放。此外,活性氧(ROS)的增加在结肠炎发展中起关键作用(见下图)。
快速诱导:通常5–7天内即可引发结肠炎。
疾病严重程度可控:通过调整DSS浓度和暴露时间实现。
与人类IBD病理相似:包括黏膜溃疡、隐窝变形等特征。
(i)
对小鼠进行耳标编号识别
称量并记录初始体重
(ii)
向笼内饮水瓶中加入DSS溶液
给药剂量:每鼠每日5ml DSS溶液
对照组:给予不含DSS的普通灭菌自来水
⚠ :
▷ :
(iv) 更换新鲜DSS溶液(5ml/鼠/天)
第5天(vi) 再次更换DSS溶液
第8天(viii) 改用高压灭菌自来水
(ix) 可选:
必须记录各实验组DSS实际消耗量
排除因饮水量差异导致的结肠炎活性变化
特别注意:遗传差异或治疗方案可能影响DSS饮用量
装置密封性
动物健康状况
溶液新鲜度
(i) 执行步骤1E(i-viii)
第22-26天(iii) 再次重复
⚠ :
第1天(ii) 腹腔注射AOM)溶液(10mg/kg)
! :
(ii(iv) 执行步骤1F(ii-iii)
Wirtz S, Popp V, Kindermann M, Gerlach K, Weigmann B, Fichtner-Feigl S, Neurath MF. Chemically induced mouse models of acute and chronic intestinal inflammation. Nat Protoc. 2017 Jul;12(7):1295-1309. doi: 10.1038/nprot.2017.044. Epub 2017 Jun 1. PMID: 28569761.
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